這樣美麗的作圖，你能猜想到是怎樣做出來的嗎?其實這是一種微生物的培養皿。有些微生物呈現不同的顏色，如金黃色葡萄球菌為粉紅色或者綠色，銅綠假單胞菌為綠色，大腸桿菌為黃色等等。通過在固體培養基上培養不同的菌落而作圖。微生物培養是科研中必不可少的一部分，尤其在進行分子克隆實驗中，常用的質粒轉化實驗便是藉助感受態的大腸桿菌獲得多拷貝的質粒，為下一步的研究奠定基礎。接下來的時間裡，小編會為大家陸續介紹分子克隆的相關知識。

今天為大家介紹下分子克隆的必備液體-LB培養基，又可分為LB肉湯培養基以及LB固體培養基。

LB肉湯培養基是一種應用最廣泛和最普通的細菌基礎培養基，有時又稱為普通培養基。生化分子實驗中一般用LB培養基來預培養菌種，使菌種成倍擴增，達到使用要求。可分為液體培養基和固體培養基。

1.LB培養基的配製體系：

5g 酵母提取物Yeast extract

10g 胰蛋白腖Tryptone

10g 氯化鈉NaCl

其中酵母提取物為微生物提供碳源和能源，磷酸鹽、蛋白腖主要提供氮源，而NaCl提供無機鹽。目前LB肉湯培養基即可以單獨購買試劑，也可選擇購買商品化三合一試劑進行配置。

2.配製方法：首先加入單蒸水，用玻璃棒攪拌溶解，然後再定容至1000ml。配置好的LB肉湯培養基分裝入錐形瓶，用封口紙封好後進行高壓滅菌20min。或者直接將其分裝至搖菌管中滅菌，以便下一步的搖菌實驗。

在配製固體培養基時還要加入一定量瓊脂作凝固劑，通常不被微生物分解利用。固態培養基配製時則按100mlLB培養基加入1.5g瓊脂粉的比例進行配置，搖勻后同樣進行高壓滅菌20min。

3.高壓滅菌后的LB固體培養基倒板方法 ：

（1）取出平板，標好平板抗生素名稱，如氨苄黴素AMP+，或者卡那黴素KANA+，一般氨苄黴素AMP+為100ug/mlLB固體培養基;卡那黴素則為50ug/mlLB固體培養基。標好平板之後，可將其至於超凈台內，打開超凈台紫外線，進行紫外滅菌20min.

（2）LB固體培養基高壓滅菌后，將融化的LB固體培養基置與室溫進行降溫，一般降至手可觸摸時，加入氨苄抗生素，並充分搖勻。注意溫度過高導致抗生素失效。

（3）倒板時，一般15-20ml倒1個板子。抗生素平板可適當倒厚點。

（4）倒好的平板一般置於超凈台內待其自然降溫，凝固。然後用封口膜封邊，並倒置放於4℃保存，盡量在一個月內使用。

【醫學方】來自於「醫學人」，始終致力於服務「醫學人」，將最前沿、最有價值的臨床、科研原創文章推送給各位臨床醫師、科研人員，關注【醫學方】頭條號，更多臨床和科研相關的實用培訓課程等著你哦~

【醫學方】已推出【醫學統計學精品公益課程】、【醫學方R語言快速入門與數據清洗】、【R語言可視化及作圖】、【GEO|TCGA|Oncomine數據挖掘教程】等視頻教程。可登陸網易雲課堂，搜索「醫學方」查詢