精子洗滌的方法種種

許多年輕夫婦還搞不清精液和精子的區別，他們很焦慮是不是性交以後的精液流出影響了受孕。在醫生建議做宮腔內人工授精（IUI）治療的時候，對於精液的處理，大多不孕夫婦很茫然，為什麼精液要洗滌？注射到宮腔里和陰道里有不同嗎？

精子洗滌的方法種種

在每個生殖中心都有這樣一個部門和單元——人工授精治療區，它由取精室、精子處理室、人工授精室等功能單位構成。這裡有非常嚴格的管理制度和工作流程。丈夫們在醫生通知的時間，進入取精室採集精液，有一個小窗口遞進精子處理室，並核對指紋。

精液在處理室經過近兩個小時的操作，洗滌好的精子懸液被送進人工授精室，核對好姓名，注射進入妻子的子宮裡，渴望精卵能夠順利遇見彼此，成就一個新的生命。

為什麼要進行精子洗滌

1677年，荷蘭的顯微鏡學家列文虎克首次利用顯微鏡觀察到了精子，正常成年男性每克睾丸組織每秒內可產生約300～600個精子，每天雙側睾丸可產生幾千萬至上億個精子。人類精子的發生需要經過一系列複雜的過程，其時程約為70天左右。

1929年《新英格蘭醫學雜誌》發表了關於精子計數可用於不育症診斷與判斷預后及治療的論文，開始了真正意義上的精液分析。

在男性射出的正常的精液中，精子佔5%，精漿佔95%，精漿是由附性腺的分泌液組成：其60%來源於精囊腺液，30%來源於前列腺液，含液化因子、鋅、枸櫞酸和酸性磷酸酶等成分，少量來自尿道球腺液和附睾液等。

精子與精漿就像魚與水的關係。在自然受孕時精漿有助於精子順利進入女性陰道，有助於精子穿透宮頸黏液，等精子進入子宮頸管后，精漿就流出體外。

在應用於宮腔內人工授精（IUI）或體外受精（IVF）等輔助生育技術都需要處理精液，去除精漿，規避了宮頸等自然屏障的阻擾。

因為精漿並不是無菌的，不能進入非常潔凈的女性子宮腔，而且精液中某些成分（如前列腺素、鋅）可刺激子宮收縮，引起疼痛，所以我們要將精子從精液中分離出來，最終提純和製備出的精子懸液，含高比例的、形態正常的、活動力強的精子，且沒有碎片和其他細胞以及死精子，這樣的精子就可以用在宮腔內人工授精和體外受精中了。

ART方案不同，精子需量身定做

輔助生育技術中卵胞漿內單精子注射（ICSI）、體外受精（IVF）、宮腔內人工受精（IUI）技術，對精子的數量和質量要求依治療方案不同而異。

（1）ICSI技術是將一個精子注入一枚卵細胞質內的顯微操作技術，對精子的數量要求最低，最低限度只要是有形態正常、活動的精子即可，屬於「一見鍾情」類，常應用於嚴重的少弱精症和受精障礙患者的治療方法；

（2）IVF治療方案中一枚卵子周圍需要3～5萬條精子擁簇才能正常受精，屬於「眾星拱月」類，常用於輸卵管因素不孕；

（3）IUI治療則需要至少一千萬以上前向活動的精子，它們浩浩蕩蕩從子宮腔出發，激流勇進，跋山涉水，最終冠軍精子在輸卵管處尋覓到卵子妹妹的芳容，攜手笑定終身，屬於「鵲橋相會」類。

實驗室精子洗滌方法種種

精液是分成數段射出的，富含精子的前列腺液，位於射精過程的初始部分，後面則主要是精囊液。所以精液標本採集是否完整、前次禁慾時間長短、附性腺分泌量、近期患病情況（尤其是發熱）、射精障礙、精神緊張等因素，都會對本次精液質量結果產生影響。

何種質量的精液標本，採用各種不同的精子洗滌方法，其產生的效果是不同的。實驗室的精子製備方法目前常用的有以下幾種:簡單的洗滌、直接上游法和非連續密度梯度離心法，各種方法之間各有優缺點。

1.「簡單的洗滌法」

就是用培養液稀釋精液標本，直接離心，收集沉澱的精子團，該方法可回收最多的精子，但夾雜死精子和其他細胞碎片；

2.「直接上游法」

是根據精子的泳動能力選擇精子。將培養液加到液化精液上方，也可以將精液加到培養液的下方，活動的精子會自動游泳到培養液里表面呼吸新鮮空氣，將聚集在培養液表層上方的優質精子收集備用；

3.「非連續密度梯度離心法」

將精液放置在不同密度梯度培養液的上方，在離心過程中由於密度不同而分離，常用上層40%和下層80%的密度梯度液，加上活動精子主動遊動，穿過梯度液在離心管底形成一個鬆軟的沉澱團，可獲得部分活力很好的精子，且不含碎片、白細胞、非精子細胞和退化的生精細胞。

三種方法中「非連續密度梯度離心法」在活動精子的回收率上明顯高於上游法，而且最終精子懸液中精漿成分污染也低於上游法。可用前列腺分泌的鋅作為可溶性的精漿成分標誌物，鋅從精漿向上層上游液的擴散呈時間依賴性，上游法製備的精子懸液中鋅的濃度比密度梯度法高。

在精子優化處理過程中，盡量選擇處理時間短，離心力低，操作輕柔，以減少對精子的損傷。許多精子洗滌液已經商品化，產品很多種，結果也更穩定。

本文作者：張燕

副主任技師

江蘇省人民醫院生殖中心