多肽合成-RGD單環肽的合成

多肽合成-RGD單環肽的合成

序列:c(Arg-Gly-Asp-d型Phe-Lys) 樹脂1g 取代度0.3mmol/mg

1. 合成序列:我們以Gly作為肽鏈的C端開始合成,合成順序為G-R-K-F-D,用固相合成法,完成序列的合成。

2. 肽鏈裂解:因為後面需要液相環合,此次我們要全保護裂解(側鏈保護基保留),我們加入20%三氟乙醇+80%二氯甲烷混合液恆溫裂解2h。

3. 用層析柱過濾去除樹脂,將溶液倒入旋蒸瓶中,用25℃恆溫旋蒸,將二氯甲烷和一些溶劑去除,然後加純凈水搖勻凍干(粉末狀)12h。

4. 將凍乾的多肽加入400ml二氯甲烷溶解,加入1mmol的用dmf溶解的HOBT,然後慢慢滴加0.5ml DIC,室溫環合反應12h,冬天最好在恆溫搖床中反應。

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5. 環合結束后,將DCM旋蒸掉,加入30ml95%三氟乙酸+5%水,室溫裂解2h,去除側鏈保護基團。

6. 將30ml的裂解液均分到4個50ml離心管中,然後加滿-4℃的乙醚搖勻析出多肽,離心2min后倒出乙醚,乳白色沉澱就是我們需要的單環肽,

今天的學習就到這啦 ,明天我們將學習固相成環法。謝謝啦,再見。

每天都要學習,這樣才能進步

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