查過敏原哪種方法最準確？---最全過敏原檢測方法介紹

引言

很多過敏性疾病大夫讓查過敏原，大家心裡肯定有一個疑惑，過敏原怎麼查？哪種查法最準確？下面我們來討論一下。

變態反應性疾病是機體對或多種物質不耐受而發生的病理性免疫應答，在最近的20～30年內，由於環境問題，氣候變化，世界範圍內的發病率都有逐年增加的趨勢，在英國每年過敏性哮喘的患兒增加5%。疾病的範圍涉及到皮膚科、耳鼻喉科、呼吸內科、消化科及兒科等，對人類健康造成了不同程度的危害，嚴重者甚至可導致生命危險。現已確認有300 多種抗原可引起過敏性疾病，變應原的識別，是變應性疾病診斷、特異性免疫治療及預防進一步暴露於過敏原的關鍵。現國內的過敏原檢測方法及試劑繁多，使檢測結果有較大差異,給臨床的診斷和治療帶來了一定的混亂。然而本文重點對變應原檢測的方法、結果的分析、存在的問題及對治療的指導加以綜述，為臨床標準化工作提供參考。

變態反應性疾病為IgE介導的Ⅰ型速發變態反應，變應原檢測可體內和體外兩種方法。

體內試驗

體內試驗可以顯示由肥大細胞脫顆粒引起的皮膚及黏膜反應。國內常用的變應原點刺液及皮試液主要有：由北京協和醫院變態反應科實驗室提供的提純液，由德國AllergoPharma公司及丹麥ALK公司提供的標準化試劑。不同的產品原理相同，操作方法大致相同，結果判斷相似，但因其含變應原的濃度不同，所得結果不盡相同。

1、皮膚試驗(skin test)

問世於1909年，具有簡單、快速、低花費和高敏感性的特點，主要分為皮內實驗和點刺試驗兩種。

1.1 皮內試驗皮內注射試驗(intradermal test, IT)

以德國AllergoPharma公司的標準化皮試液為例。方法: 將皮試液0.01～0.05ml注射到上臂外側或後背皮內，10～20min後讀試驗結果。對照、變應原皮試液提供單位及結果判斷點刺試驗。

皮內試驗是皮膚試驗的經典方法，結果較可靠、測試劑量控制較嚴格。近年來由於此法較繁瑣，有一定痛感，不適合於小兒患者，已逐漸被點刺試驗所取代。如青霉素皮試就屬於皮內試驗。

1.2皮膚點刺試驗(skin prick test, SPT)

點刺試驗可視為一種特殊的皮內試驗，是目前國際特別是歐美國家推崇的過敏原體內檢測方法。因其是皮膚的點刺液僅為皮內試驗的萬分之一，安全性及靈敏度高、準確度高，由於皮損小，患者無痛楚，就如被蚊叮一樣等特點，已逐漸取代了傳統的皮內試驗。被認為是檢測吸入性過敏原引起的過敏反應的首選檢測方法。並成為過敏性疾病的主要的診斷工具。

【原理】當有某種變應原進入皮膚時，對某些物質有速髮型過敏反應的患者，立即特異性地引起皮膚內的肥大細胞脫顆粒，釋放組胺等活性物質，導致局部毛細血管擴張(紅斑)，毛細血管通透性增強(水腫、風團)，陽性者表示對該抗原過敏。

【方法及結果判定】以德國AllergoPharma公司的標準化點刺液為例。變應原點刺液滴到前臂掌側皮膚，將點刺針垂直通過滴在皮膚的試液刺入皮膚， 10～20min後讀試驗結果，含0.4％苯酚生理鹽水作陰性對照，含0.4％苯酚的0.1％組胺溶液作陽性對照。結果判斷如下:出現淡黃色皮丘，其周圍有紅斑，為陽性反應。皮丘大於組胺為++++，皮丘等於組胺為+++，皮丘小於組胺為++或+，與生理鹽水相同為陰性。

【適應症】可用於變應性鼻炎、濕疹、過敏性哮喘等變應性疾病的診斷及特異性免疫治療前.

【禁忌證】有青霉素皮試過敏性休克史者；明顯損害全身狀態的疾病；試驗部位有皮膚病變的疾病；接受β阻滯劑或ACE抑製劑的患者；腎上腺素過敏的患者；妊娠；5歲以下。相對禁忌證：服用抗組胺葯在藥物3半衰期內；有可能的話，盡量在少癥狀的時候進行診斷。

【併發症】局部皮疹、皮膚壞死；極罕見全身嚴重副反應，如過敏性休克、喉水腫等。

【優點】特異性高，假陽性率低，簡單、準確、經濟。皮膚點刺試驗因其安全，易於操作,靈敏度高，臨床相關性好，痛苦小、副作用小，適合於兒童及高度敏感的，

【缺點 】 化驗項目較少，主觀成分佔得比較大。

【注意事項】 歐洲變態反應和臨床免疫學協會（EAACI）推薦其為最在檢測開始前，一定要詳細詢問病史，檢測要在有經驗及具備搶救能力和設備的醫院進行。

2. 特異性激發試驗（specific provocation test）

是模擬自然發病條件、以少量致敏原引起一次較輕的變態反應發作、用以確定變應原的試驗。根據患者發病部位的不同，可以進行不同器官的激發試驗。

【方法及結果判定】 支氣管激發試驗：試驗前先測第一秒用力呼氣量（FEV-1）和肺活量；吸入對照液或抗原液，吸入后15～20min複查FEV-1。結果判定 陽性結果的判定標準如下：(1)明顯自覺癥狀，如胸部緊迫感和喘息等；(2)肺部聞及哮鳴音；(3)FEV-1下降20％以上。鼻黏膜激發試驗： 可經抗原吸入法（粉劑）或滴入法（液體）進行，接觸抗原15～20min后出現黏膜水腫和蒼白，病人出現鼻癢、流涕、噴嚏等癥狀可即判為陽性反應。結膜激發試驗：將適當濃度的變應原浸液滴入患者一側眼結膜，另一側滴入生理鹽水作對照；15～20min觀察結果。試驗側結膜充血、水腫、分泌增加、癢感，甚至出現眼瞼紅腫等現象者為陽性反應。

【適應症】激發試驗檢測的適應證為臨床高度懷疑為變應性疾病，而皮膚試驗及體外試驗為陰性的患者；多種過敏原過敏，尋找責任過敏原；過敏性哮喘患者免疫治療前了解其耐受性等。

【優點】對食物過敏的患者為診斷的金標準。激發試驗較皮膚試驗的特異性高，與患者的病史、癥狀和過敏原吸附試驗的相關性較強。

【注意事項】此試驗有引起嚴重的哮喘急性發作或過敏性休克等嚴重併發症的潛在危險，所用抗原濃度不宜過高，應該由小到大遞增；試驗前必須做好系列搶救準備。

3特異性斑貼試驗（atopic patch test, APT）

斑貼試驗是診斷接觸性皮炎最可靠和最簡單的方法。斑貼試驗的應用已有百年歷史，對接觸性皮炎及某些過敏性皮膚病診斷的可靠性得到了充分證明，促進了接觸性皮炎與皮膚變態反應檢測的發展。

【原理】

將可疑致敏物質敷貼於患者皮膚上，通過皮膚或粘膜進入機體後由抗原呈遞細胞將抗原呈遞給T淋巴細胞，使特異性T淋巴細胞活化，誘發炎症反應。

【方法及結果判定】 以瑞典化學診斷AB公司的歐洲標準變應原的試器及斑貼試驗為例。將變應原適量分別置於斑試器小室內,液體變應原則先在斑試器內放一濾紙片,然後滴加變應原。將加好變應原的斑試膠帶貼敷於患者背部肩胛下方無皮損處皮膚,並標記,囑患者3 天內禁止劇烈活動。48h 後去除斑試物並觀察記錄，72h再次進行觀察，判定結果。判讀標準以國際接觸性皮炎研究組推薦的標準為依據。

【適應症】 1、 接觸性皮炎、濕疹、職業性皮膚病等因接觸某些物質引起的變態反應發生的皮膚病。

2、當病因不明或有數種物質接觸，需要尋找病因時，可做斑貼試驗。

【相對禁忌證】皮膚有廣泛病變者。

【併發症】可以引起接觸性皮炎。副反應輕微，有皮疹及瘙癢的報道。

【優點】使用方便,結果準確。斑貼試驗的靈敏度為97.8%,特異度為76.9%,準確性為90.3%,陽性預測值為88.2%,陰性預測值為95.2%。

【缺點】檢查耗時長，容易脫落，檢查項目少，無法檢查食物及吸入性過敏原。

【注意事項】盡量少活動，不出汗以防斑貼移位或脫落。

4.化妝品過敏檢測：

通過封閉式斑貼法、光斑貼法、水皰皰液檢測法、劃破實驗法等準確檢測出過敏原與過敏的化妝品，並指導患者選擇適合的化妝品。我國採用歐洲標準化斑貼試劑，檢測精確。

光斑貼試驗photo-patchtest通過在皮膚表面直接敷貼，並同時接受一定劑量適當波長紫外線照射的主法，檢測光毒性與光變應性皮炎的光敏劑以及機體對某些光敏劑的光毒性或光變應性反應的一種皮膚試驗。患光線過敏性皮膚病時為了證實有無光感物質存在應作光線斑貼試驗。特別對外因性光敏物質有用；方法和一般的斑貼試驗一樣，首先將被檢物貼敷在患者背部或前臂屈側，同時照射UVB(280-320nm)和(320-400nm)，測定其最小紅斑量(MED)。24-48小時后以3/4MED的光線照射貼敷物的一半，再過48小時觀察結果，如果僅在貼敷物+照射部位發紅，浮腫或發生小丘疹(有時發生小水皰)時為物質。

體外試驗

體外試驗為免疫化學測定，一般是檢測血清中的sIgE。適應症：(1)皮膚病變廣泛，無法行皮試；(2)有抗原誘發嚴重過敏反應史，體內試驗有一定危險者；(3)服用抗組胺葯后皮膚反應受抑制，皮試結果不準確；(4)該抗原不能作皮試，如化工原料等；(5)皮膚試驗結果與臨床病史不符，需要進一步分析驗證；(6)特異性免疫治療前，明確責任過敏原。體外試驗安全無副反應及禁忌證。國內已出現多種檢測系統，以下就不同的原理分述之。

1 放射性變應原吸附試驗（radio allergo sorbent test, RAST）

【原理及結果】 以瑞典Pharmacia 公司生產的Uni- CAP 系統最有代表性，它的基本原理是將變應原吸附在一種稱作immuno CAP 的新型固體上，後者是裝在小膠囊中的親水性載體聚合物，由活化的纖維素衍生物合成，與變應原有極高的結合能力。每個固相載體CAP均包被了不同的變應原，如患者血清中有針對該變應原的IgE，即可與變應原特異性結合，再加入酶標記的兔抗人抗IgE 血清（酶標二抗），即可形成固相載體—變應原—IgE—酶標二抗的複合物，經過洗滌及加入基質，最後加入發展液，發出熒光，根據熒光吸光度換算IgE含量，待測血清的熒光吸光度大於參考品為陽性，小於參考品為陰性，主要操作程序由儀器自動完成，並由儀器自動列印出結果。

【適應症】適用於皮試呈現假陽性的划痕症患者、嚴重過敏狀態發作者、嚴重皮炎不能作皮試者以及皮膚反應差的老年人及3歲以下兒童，沒有用昆蟲、動物皮屑等變應原作皮試時產生的全身不適感，對過敏嚴重度評估，擬行特異性免疫治療者用藥前評估。

【禁忌症】安全無副反應及禁忌證

【優點】靈敏度高、特異性高，一種過敏原一個反應帽，臨床選擇餘地大，可多可少，任意組合。最多可以查600種過敏原。抽血量少，痛苦小。不受對症治療用藥的影響，也不受過敏癥狀的干擾。全自動出結果，客觀性強。被譽為過敏原體外檢測的「金標準」。

【缺點】價格高。

2 酶聯免疫法（ELISA）

【檢測原理及結果】 以美國ASI公司過敏原體外檢測試劑盒為例，它的基本原理是：當具有過敏抗原固化於表面的載體與病人血清培養在一起后，血清中特異性IgE就會特異地結合到抗原上，此特異結合的抗體可被酶聯的二抗所識別，加入顯色劑后，二抗所聯的酶使顯色劑由橘黃色變為藍色。顯色的深度與血清中特異性IgE成正比；能定性/半定量地檢測血清中特異性IgE的濃度。結果判定：根據顯色的不同，可鑒定為5個等級（0～4級）。

3、免疫印跡法

【檢測原理及結果】 以德國MEDIWISS公司生產的AlleryScreen過敏原檢測系統為例。特異性過敏原被吸附於硝酸纖維素膜表面，加入患者血清后孵育，標本中的特異性IgE與過敏原發生反應，結合到硝酸纖維素膜上。加入鹼性磷酸酶標記的鏈酶親和素，與生物素結合。加入BCIP/NBT酶作用底物孵育后，發生特定底酶顯色反應，試劑條上出現沉澱。顏色的深淺與血清中sIgE抗體含量成正比，待試劑條幹燥后，由專用過敏原監測儀檢測，讀取定量檢測結果。

【系統特點】 其他方法是將過敏原共價修飾結合於固相物，而此系統中濃縮的過敏原是未經任何修飾地連接到硝酸纖維素膜上，並且使用了生物素－親和素放大系統，使得及微量的IgE亦可被檢測。AlleryScreen系統有極好的敏感度，與CAP系統相似，但與皮試相比略低。在一個標本內檢測可到20種抗原，僅需250μl血清，可以作為臨床過篩試驗。

【優點】操作簡單、方便、成本低。可靠性高，特異性好，敏感度高。

4、食物不耐受的檢測

食物不耐受指的是一種複雜的變態反應性疾病。

人的免疫系統把進入人體內的某種或多種食物當成有害物質，從而針對這些物質產生過度的保護性免疫反應，產生食物特異性IgG抗體，IgG抗體與食物顆粒形成免疫複合物（Ⅲ型變態反應），可引起所有組織（包括血管）發生炎症反應，並表現為全身各系統的癥狀與疾病。

通常做的食物不耐受14項檢測包括：牛肉、雞肉、鱈魚、玉米、螃蟹、雞蛋、蘑菇、牛奶、豬肉、大米、蝦、大豆、西紅柿和小麥。此組合是根據大量臨床流行病學統計數據得出的結果。

檢測只需抽取1毫升血液。抽血前可正常飲食，無需特殊要求。

採用酶聯免疫吸附法（ELISA）進行測試。該測試結果能顯示受檢者是否對某種食物不耐受以及不耐受程度（輕度、中度或是重度）。醫生可據此給出正確的飲食建議。IgG抗體通常介導延遲性過敏反應，目前我國還只能運用其檢測慢性的食物過敏，我們臨床稱為食物不耐受檢測，通過這種檢測能將我們自己無法觀察到的，慢慢損傷我們身體的食物篩查出來，從而避免許多慢性疾病（哮喘、鼻炎、失眠、頭痛、慢性腹瀉、口腔潰瘍、蕁麻疹、痤瘡、易疲勞、憂鬱、氣喘、睡眠障礙、磨牙等等），這種檢測是目前我國過敏原檢測方法中最有意義的。但不足的是僅開展了對食物的檢測，尚不能通過這種方法檢測吸入和接觸過敏原。

食物不耐受檢查也是唯一針對食物過敏的遲發反應(IgG)檢測手段。

5、生物共振

根據物質波理論，所有物質都具有特異性的基礎振動頻率，當兩種相同的振動頻率相遇時可發生波的疊加而增幅，這種共振效應同樣存在於聲波、電磁波等一切波動的物質。利用這一原理可以鑒別一種波與另一種波是否相同，若相同則發生共振，不相同則不發生共振，BICOM利用共振效應，檢測不同物質是否可以在體內引起有特異性的頻率變化來確定過敏物質即過敏原。

百康生物物理過敏原檢測：利用細探針對人體手指信息點進行檢測，觀察電磁信號的變化確定過敏原。

百康生物物理過敏原檢測主要有以下優勢：①無痛、無創、無需抽血、無副作用；②隨機配備近500種、5大類過敏原，還可以自帶實物檢測懷疑過敏的物質，過敏原種類無限量；③檢測時間短，15~20分鐘可立即得出檢測結果；④可進行藥物檢測，檢測該藥物是否有效；⑤檢測準確，臨床符合率高；⑥適應人群廣泛：所有過敏及過敏疾病潛在人群，兒童至老年均可；⑦並且可以迅速進行脫敏治療，治癒過敏性疾病。

百康脫敏治療優勢：①無痛、無創、無副作用、治癒率和有效率高；②針對過敏物質，進行脫敏治療；③利用多種電極及調節墊在多個治療程序上進行治療，程序化控制；④治療時間短：常規治療30~40分鐘；⑤療程短、見效快：8次為一個療程，一般1-2次治療過後，病症會有明顯改善；⑥慢性病人一周1次，急性病人每日或隔日1次。

有一點需要注意這種方法很多教授不相信其科學性，不推薦

白細胞反應性實驗

通過儀器觀察人體白細胞對過敏原的反應變化，了解人體是否對其過敏。這種方法是現今世界最為準確的過敏原檢測法，能檢測的過敏原範圍也廣，甚至能檢測出香精香料等添加物的過敏性。可惜我國還沒有開展這種先進的檢驗。

變應原臨床檢測的選擇及診斷

變態反應性疾病的變應原診斷是一個綜合過程，包括明確的臨床病史（過敏原吸入過敏史、接觸過敏史及食物過敏史），皮膚試驗，特異性激發試驗及血清特異性IgE的檢測等。

皮膚點刺試驗因其簡單、經濟、安全，為首選檢查。皮膚試驗與病史相符時，可以明確診斷。分析皮膚試驗結果必須結合病史，皮膚試驗陽性，與病史相符，則提示其為疾病的致敏原；相反，病史陰性，皮試也陰性，基本可認為該變應原與本病無關。皮膚試驗診斷多種過敏原過敏，應作血清IgE及激發試驗明確責任過敏原。皮膚試驗與病史不相符時，應進一步做血清IgE及激發試驗以綜合分析。

血清特異性IgE檢測，可作為皮膚試驗有禁忌證、皮膚試驗與病史不符、皮膚試驗診斷為多種過敏原過敏的患者。有多種過敏原過敏的患者，皮膚試驗及血清特異性IgE分級都高的變應原可考慮為責任變應原。

規範的激發試驗是最可靠的特異性診斷方法，尤其對於食物過敏的患者，因食物過敏原的皮膚試驗和特異性IgE檢測結果準確性差，隨機雙盲的食物激發試驗是診斷食物過敏的金標準。激發試驗因其有誘發嚴重過敏反應的可能，不能作為臨床常規的檢查方法。當皮膚試驗及血清特異性IgE均為陰性，臨床有明確過敏原接觸過敏史，有確診必要性時；當已確診多種過敏原過敏，不能確定責任過敏原時；過敏性哮喘患者在特異性免疫治療前，為評估治療耐受性時，可做激發試驗。激發試驗只有在非常必要時進行，患者知情同意，有搶救措施及能力，出現副反應及時救治。在疾病發作期不宜進行激發試驗。

總之，過敏原的診斷需要有經驗的醫生根據病史和檢查做出全面、正確的評估。

小編摘要

總結

皮膚點刺試驗是檢測吸入性過敏原引起的過敏反應的首選檢測方法。是過敏性疾病的主要的診斷工具。

規範的激發試驗是最可靠的特異性診斷方法，尤其對於食物過敏的患者，因食物過敏原的皮膚試驗和特異性IgE檢測結果準確性差，隨機雙盲的食物激發試驗是診斷食物過敏的金標準。

斑貼試驗是診斷接觸性皮炎最可靠和最簡單的方法。

食物不耐受檢查也是唯一針對食物過敏的遲發反應(IgG)檢測手段。

免疫印跡法可作為過敏原初篩。

特異IgE檢測被譽為過敏原體外檢測的「金標準」。可以幫助尋找責任過敏原。

所以，根本沒有最準確的檢測方法，每種方法都有長處，有定位。只有結合醫生的經驗，多種檢測方法相結合才能找出準確的過敏原。你明白了么？